輔酶IINADP(H)含量測試盒 生化試劑
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輔酶IINADP(H)含量測試盒,分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用使氧化型唾哇藍 (MTT) 還原為甲,570nm下檢測吸光值,從而測定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP為NADPH,從而檢測NADP*含量。
輔酶IINADP(H)含量測試盒
(規格:50T/24 樣 分光光度法)
一、測定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用使氧化型唾哇藍 (MTT) 還原為甲,570nm下檢測吸光值,從而測定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP為NADPH,從而檢測NADP*含量。
二、儀器設備(自備)
可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
三、試劑組成:(50T/24 樣)
酸性提取液:50mlx1 瓶,4C保存:
堿性提取液:50mlx 瓶,4C保存:
試劑一:液體15 mlx1 瓶,4C保存:
試劑二: 粉劑x1 支,-20C保存,用時加入4ml 蒸留水,混勻:用不完的試劑4C保存一周:試劑三:粉劑x1 支,-20C保存,用時加入4ml 蒸餾水,混勻:用不完的試劑4C保存一周試劑四:粉劑x1 支,4C保存,用時加入4ml 蒸餾水,混勻: 用不完的試劑4C保存一周:
試劑五;液體1.8mlx1 支,4 C保存:
試劑六:液體30mlx1 瓶,4 C保存:
試劑七:液體50mlx1 瓶,4 C保存
四、操作步驟
NADP+和NADPH的提取:
詳見試劑盒內說明書關于樣本處理的說明。測定組織、細菌和細胞時需要測定蛋白濃度。可用本所的A045-2總蛋定測試盒(考馬斯亮藍法)或A045-3、A045-4總蛋白定量測試盒(BCA法)進行蛋白濃度的測定。
輔酶IINADP(H)含量測試盒