RNA電泳
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RNA電泳服務介紹:完整的RNA在瓊脂糖凝膠中能看到3條帶,判斷RNA是否降解。
RNA電泳
服務介紹:
完整的RNA在瓊脂糖凝膠中能看到3條帶,判斷RNA是否降解。
名稱 | 規格 |
RNA電泳 | 板(8個樣) |
實驗流程:
配置電泳膠-點樣-電泳-拍照-發報告
送樣運輸要求:
1. 樣品處理
a) 動物組織:常規組織100mg,脂肪組織,結締組織,纖維化組織適當增加。將組織剪切成合適大小后(建議組織塊長寬高均不大于0.5 cm),然后迅速完-全浸泡于5~10倍體積的RNAsolidTM試劑中。(注意:已浸入RNAsolidTM試劑中的組織經平衡一段時間后,可從溶液中取出,切成更小的組織塊,再重新放回RNAsolidTM試劑中;有些比較弱的液體滲透性組織如骨頭等,不適合用RNAsolidTM試劑進行RNA保護。)
b) 植物組織:新鮮的葉、果肉、種子最少100 mg。將嫩葉,嫩莖組織切成合適的大小(建議長寬高均不大于0.5 cm)后,然后迅速完-全浸泡于5~10倍體積的RNAsolidTM試劑中。(注意:某些植物組織天生具有的屏障,如葉子表面的蠟層可阻礙RNAsolidTM試劑的滲透,對于此類組織,通常需破壞這些屏障層以允許溶液的浸透。)
c) 細胞等樣本:收集不小于10^6個細胞的沉淀(用PBS清洗1-2次)。之后迅速加入5~10倍體積的RNAsolidTM試劑。
d) 酵母、細菌等樣本:離心棄上清,收集小米粒大小的單菌體沉淀,然后迅速加入適量的RNAsolidTM試劑完-全浸沒菌體沉淀。
e)全血:最少1 mL新鮮血液EDTA抗凝管,-20度運輸。
f)血清:最少1 mL,干冰運輸。
g) RNA樣品: OD260/280為1.8-2.0,濃度≥100 ng/μL,體積≥20μL,干冰運輸。
2. 樣品保存及運輸
加入有RNAsolidTM試劑的樣本可在37℃保存1~2天,2天以后部分組織中的RNA會開始降解。室溫(25℃)穩定保存1周,不會有明顯的RNA降解發生。大部分樣品置于RNAsolidTM試劑中,4℃條件下可穩定保存1個月,不會有明顯的RNA降解發生。長期存放可先將保存在RNAsolidTM試劑中的樣本4℃浸透過夜,然后將RNAsolidTM試劑吸出棄去,再將樣本放入-20℃或-80℃長期穩定保存3~5年。