研究如何選擇樣品稀釋液
更新時間:2020-10-15 點擊次數:880次研究如何選擇樣品稀釋液
1.嗜滲菌和嗜鹽菌的稀釋液
20%的無菌蔗糖溶液適用于嗜滲菌計數,研究嗜鹽菌(如食鹽樣品)時,可使用15%無菌的氯化鈉溶液作為稀釋液。
2.厭氧微生物的稀釋液
對食品中的厭氧微生物進行定性或定量檢測時,必須使氧化作用減至zui低,此時應使用梭狀芽孢桿菌培養基或具有相似成分的培養基作為稀釋液。制備樣品懸液時應盡量避免氧氣進人其中。這時zui常用的Colworh均質器,而不用頂部攪拌均質器或底部攬拌的均質器,后兩者只有當均質容器中充滿脫氧氮氣時才可使用。
檢測對氧氣極其敏感的厭氧菌時,除使用適當的稀釋液外,還要具備一些特殊的樣品防護措施,如使用Hungate技術或厭氧工作站等。
3.普通稀釋液
0.1%pH6.8~7.0的無菌蛋白胨水,磷酸鹽緩沖溶液或25%Ringer氏溶液都是較好的稀釋液;0.1%的蛋白胨水要比磷酸鹽緩沖液或25%Ringer氏溶液保護效果更好,因此是zui常用的稀釋液。
在zui低稀釋度時,樣品可能會改變稀釋液的性質。特別是當樣品中水不溶物占的比例很大時,樣品在稀釋液中的溶解度會受到影響。食品樣品的溶解度到底有多大,是不是稀釋液的pH或水分活度(AW)也會受到影響。如果有疑問,應該測定第-一個稀釋度的pH,水分活度可用水分活度儀或類似的儀器測定(通過測定樣品中可溶性固型物可以得到水分活度的變化>。為了防止pH變化,可在稀釋液中加入磷酸鹽緩沖液。例如Dixont和Wilson(1960)成功地用pH7.0-7.2 0.5mol/1磷酸鹽緩沖液稀釋了含園藝肥料的過磷酸鈣,從中分離得到沙門氏菌。而以前一直認為這樣的肥料不含沙門氏菌。
高溶解度的干燥樣品(如奶粉、嬰兒食品)在zui低稀釋度時水分活度很低,應該選擇蒸餾水作為稀釋液; 一般說來,zui合適的稀釋液應該通過一系列的試驗得到,所選擇的稀釋液應該具有zui高的復蘇率。
樣品稀釋液的制備過程應在15~30min內完成。