禽白血病抗原檢測試劑盒現(xiàn)貨
更新時間：2020-07-29 點擊次數(shù)：1170次禽白血病抗原檢測試劑盒現(xiàn)貨?
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【產(chǎn)品簡介】
ALV可引起不同的腫瘤性疾病，包括淋巴白血病、成紅細胞瘤、成髓細胞瘤等。p27是ALV病毒群（A，B，C，D，E和J亞群）的主要gs抗原，高度保守，因而p27抗原的檢測是ALV抗原檢測的基礎(chǔ)。
本試劑用于檢測p27，采用稀蛋清和泄殖腔拭子樣品進行檢測，雖然血清在ALV抗原的檢測中是有效的，但由于潛在內(nèi)源性病毒序列的干擾，因而在外源性病毒的檢測中不采用血清樣品。在p27抗體包被96孔反應(yīng)板中，樣品中的p27抗原與包被的抗體可以形成復(fù)合物。洗掉未結(jié)合的物質(zhì)后，再加入辣根過氧化物酶標記的抗p27抗體，后者與結(jié)合在孔中的p27結(jié)合。隨后，洗掉未結(jié)合的標記物，加入底物液，生成的顏色與檢測樣品中的p27含量有關(guān)。由于蛋清較粘稠，本說明書介紹了改進的樣品處理/洗滌方法。
【產(chǎn)品用途】
禽白血病抗原檢測試劑盒(ALV Ag)是用于檢測雞血清、泄殖腔拭子和蛋清樣品中的禽白血病病毒(ALV)p27抗原的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒。
【產(chǎn)品內(nèi)容】
| 試劑盒主要成分 | 數(shù) 量 |
| 抗p27抗體包被板 | 96T×2 |
| 陽性對照 | 0.8ml×1 |
| 陰性對照 | 0.8ml×1 |
| 酶標記抗體 | 20ml×1 |
| 樣品稀釋液 | 45ml×2 |
| 底物液 | 24ml×1 |
| 終止液 | 24ml×1 |
| 20×濃縮洗滌液 | 45ml×2 |
| 封口膠 | 2份 |
| 使用說明書 | 1份 |
【用法與判定】 按以下步驟進行：
1、需要自備的器材
1.1精密單道移液器和多道移液器
1.2一次性吸頭，
1.3 96孔酶標儀
1.4樣品稀釋試管，
1.5蒸餾水或去離子水，
1.6洗滌溶液滴加和吸取裝置（洗板機）
操作步驟中列出的試劑體積要求移液器誤差不超過±5%。
2、樣品的準備
蛋清—收集稀蛋清，無需稀釋直接加到ELISA反應(yīng)板中。凍融樣品可降低其粘稠度。
泄殖腔拭子—將泄殖腔拭子加到1mL培養(yǎng)液中或樣品稀釋液中冷凍。檢測前，將樣品恢復(fù)至18-26℃，讓雜質(zhì)沉淀下來。吸取100 μL上清，加到ELISA反應(yīng)板中。
血清—用于p27的常規(guī)檢測，無需稀釋血清樣品直接加到反應(yīng)板中。因為內(nèi)源性病毒的干擾作用，不使用血清樣本進行外源病毒p27的檢測。
3、操作步驟 （適用于蛋清以外的樣品）
使用前應(yīng)輕輕旋轉(zhuǎn)或震蕩予以混勻，所有試劑應(yīng)恢復(fù)至室溫。
3.1 取出抗體包被板，記錄樣品的位置。
3.2 在適當(dāng)?shù)膬煽字蟹謩e加入100μL未稀釋的陰性對照。
3.3 在適當(dāng)?shù)膬煽字蟹謩e加入100μL未稀釋的陽性對照。
3.4 在剩余的孔內(nèi)分別加入100μL被檢樣品。樣品既可采用雙孔檢測也可采用單孔檢測。樣品無需稀釋用于檢測。
3.5. 蓋好反應(yīng)板蓋板，在18-26℃條件下孵育60分鐘（±5分鐘）。
3.6 用大約350μL蒸餾水或去離子水洗滌板孔，重復(fù)3－5次。后一次洗板后將液體拍干。
3.7 每孔加入100μL酶標抗體。
3.8 蓋好反應(yīng)板蓋板，在18-26℃條件下孵育60分鐘（±5分鐘）。
3.9 重復(fù)步驟3.6。
3.10. 每孔加入100μLTMB底物液。
3.11 蓋好反應(yīng)板蓋板，在18-26℃條件下孵育15分鐘（±1分鐘）。
3.12每孔加入100μL終止液終止反應(yīng)。
3.13.測量并且記錄樣品和對照于650nm波長的吸光值A(chǔ)(650)。
蛋清樣品洗滌方法
稀蛋清樣品有時很難用上述標準的方法，用水*從反應(yīng)板上洗掉。本試劑盒準備了20倍濃縮洗滌液，用于蛋清樣品的洗滌。
洗滌溶液的制備
20倍濃縮洗滌液應(yīng)恢復(fù)至18-26℃并使沉淀的鹽溶解混勻。使用前，用蒸餾水或去離子水對蛋清濃縮洗滌液應(yīng)進行20倍稀釋（例如：每板用20mL濃縮洗滌液加入380mL水中）。蛋清樣品洗滌步驟
除了步驟3.6和步驟3.9的洗滌方法外，蛋清樣品的檢測步驟與上述步驟相同。吸出對照和被檢蛋清樣品孔中的液體，每孔加入大約350μL上述制備的洗滌溶液，浸泡兩分鐘，吸出孔中液體。再重復(fù)4次，但每次不用再浸泡2分鐘。
4、結(jié)果判定
陽性對照的平均值減去陰性對照的平均值（PC`x-NC`x）必須大于0.200，陰性對照平均值必須小于或等于0.150，試驗方能有效。被檢樣品中是否含有p27抗原與其A(650)和陽性對照的平均值的比值有關(guān)。陽性對照已經(jīng)標準化處理，代表顯著的抗原水平(大約10ng/mL)。被檢樣品抗原的相對含量通過計算樣品與陽性對照比值（S/P）來確定。如果S/P小于等于0.20，樣品為陰性；如果S/P大于0.20，說明樣品中存在p27抗原。
5、計算公式
【注意事項】
1.認真處理所有的ALV材料以免ALV的傳播，陽性對照可能成為ALV的傳染源，盡管陽性對照已經(jīng)過化學(xué)處理滅活，但不能認為其*滅活。
2.試劑盒的一些成分含有疊氮鈉作為防腐劑。
3.處理各組分要按照當(dāng)?shù)?、區(qū)域以及國家規(guī)定進行。
4.不要將TMB暴露于強光和任何氧化劑下，所有的試劑應(yīng)在2－8℃儲存，所有的廢棄液應(yīng)在丟棄前合理處理以免污染。
5.不要使用超過有效期的試劑，不同批次的試劑盒成分不要混用。在整個操作過程中，仔細的滴加和洗滌對結(jié)果的精確性和準確度是十分重要的。
6.按照本程序操作，將會獲得佳結(jié)果。
7.于獸醫(yī)使用。
【規(guī)格與包裝】96T×2
【貯藏與有效期】2～8℃避光保存，有效期為12個月
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