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乙醇酸氧化酶測(cè)試盒的檢測(cè)原理是什么-信帆生物為您答疑解惑

乙醇酸氧化酶（glycollic oxidase, GO）試劑盒

測(cè)定意義

乙醇酸氧化酶（EC1.1.3.15）是植物光呼吸代謝中的關(guān)鍵酶，也是光下合成草酸的關(guān)鍵酶，

它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，對(duì)研究光呼吸代謝過(guò)程及其調(diào)控具有重要意義。

測(cè)定原理

乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和鹽酸苯肼反應(yīng)生成乙醛酸苯腙，在

324nm 有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL 石英比色皿。

試劑組成和配制

提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：液體 35mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃避光保存，臨用前加 10mL 雙蒸水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃

保存，禁止反復(fù)凍融。

試劑三：液體 5mL×1 瓶，4℃保存。

酶液提取

按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL

提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。12000g， 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

注意事項(xiàng)

1. 測(cè)定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，若吸光值較高，請(qǐng)將樣品用提取液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y(cè)定，并在

計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。2. 色素含量較高的樣品，可在提取酶時(shí)加活性炭吸附。

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