明膠酶譜分析試劑盒使用注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2018-08-01 點(diǎn)擊次數(shù):1241次明膠酶譜分析試劑盒使用注意事項(xiàng)
信帆生物推出明膠酶譜分析試劑盒,檢測(cè)基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2,MMP9活性,操作方便簡(jiǎn)單,可以檢測(cè)細(xì)胞樣本,細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本,全血樣本等,質(zhì)量穩(wěn)定!
操作注意事項(xiàng):
1.制備聚丙烯酰胺時(shí)應(yīng)注意排除氣泡。
2.明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩沖液配制應(yīng)嚴(yán)格準(zhǔn)確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。
3.用大梳子
4.孵育液的PH在7.5-7.6,復(fù)性的TRITON時(shí)間長(zhǎng)了會(huì)有絮狀物,所以實(shí)驗(yàn)時(shí)盡量使用新鮮配置的。
5.孵育的37度不要在CO2培養(yǎng)箱中,因?yàn)闀?huì)改變孵育液的PH值,在普通孵箱即可。
6.細(xì)胞樣本用PBS 5倍體積震蕩裂解,估算細(xì)胞的體積,然后加入5倍體積的PBS,渦旋振蕩15-30s,而后靜置或低速離心.或者手動(dòng)震蕩。
明膠酶譜分析試劑盒采用酶譜法(zymography)檢測(cè) MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE 電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測(cè)方法,其靈敏度可達(dá) 1 nM,高于 ELISA 方法,而且可檢測(cè)幾百個(gè)樣本。
明膠酶譜分析試劑盒使用注意事項(xiàng)