十六烷基*基溴化銨(CTAB)的使用方法
更新時(shí)間:2018-04-25 點(diǎn)擊次數(shù):2367次十六烷基*基溴化銨(CTAB)的使用方法,信帆生物供應(yīng)十六烷基*基溴化銨(CTAB),現(xiàn)貨供應(yīng),咨詢!
十六烷基*基溴化銨(CTAB)呈白色或淺黃色結(jié)晶體至粉末狀,有刺激氣味,易溶于異丙醇,可溶于水,震蕩時(shí)產(chǎn)生大量泡沫,能與陰離子、非離子、兩性表面活性劑有良好的配位性。具有優(yōu)良的滲透、柔化、乳化、抗靜電、生物降解性及殺菌等性能。
CTAB是一種去污劑,可溶解細(xì)胞膜,它能與核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時(shí),從溶液中沉淀,通過(guò)離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白,多糖類(lèi)物質(zhì)分開(kāi)。zui后通過(guò)乙醇或異丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。
1、用CTAB提取提DNA的配方:
Tris-HCl(pH8.0)提供一個(gè)緩沖環(huán)境,防止核酸被破壞;
EDTA螯合Mg2+或Mn2+離子,抑制DNase活性;
NaCl 提供一個(gè)高鹽環(huán)境,使DNA充分溶解,存在于液相中;
β-巰基乙醇是抗氧化劑,有效地防止酚氧化成醌,避免褐變,使酚容易去除基因組DNA。
CTAB 4g
NaCl 16.364 g
1M Tris-HCl 20ml( PH8.0)
冷卻后0.2-1%2-巰基乙醇(400ul)氯方-異戊醇(24:1):先加96ml氯方,再加4ml異戊醇,搖勻即可。
2、用CTAB提取提RNA的配方:
2% CTAB(W/V)
2%聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V)
100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC處理的水配制)
25mM EDTA
由于在高溫滅菌條件下,Tris-HCl要和DEPC發(fā)生反應(yīng),所以配RNA提取緩沖液時(shí)直接用DEPC 處理的水配制即可。
十六烷基*基溴化銨(CTAB)的使用方法