小鼠雌二醇(E2)ELISA檢測(cè)原理
更新時(shí)間:2024-10-15 點(diǎn)擊次數(shù):185次小鼠雌二醇(E2)ELISA檢測(cè)原理
產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠雌二醇(E2)ELISA檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng):Mouse Estradiol (E2) ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
有效期:6個(gè)月
保存條件:2-8℃
用途:本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中小鼠雌二醇(E2)的含量。
檢測(cè)原理:
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠雌二醇(E2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠雌二醇(E2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
產(chǎn)品組成:
名稱(chēng) | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無(wú) |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL×6管 | 0.3mL×6管 | 無(wú) |
樣本-稀釋液 | 6mL | 3mL | 無(wú) |
檢測(cè)抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無(wú) |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無(wú) |
底物B | 6mL | 3mL | 無(wú) |
終止液 | 6mL | 3mL | 無(wú) |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無(wú) |
說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 | 無(wú) |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 無(wú) |
注:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:64、32、16、8、4、2 pmol/L
2. 經(jīng)過(guò)大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測(cè)范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)過(guò)程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過(guò)最大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),可用樣本-稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
自備物品:
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算:
以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度。
試劑盒性能
1. 檢測(cè)范圍:2 pmol/L - 64 pmol/L。
2. 靈敏度:最-低檢測(cè)濃度小于0.1 pmol/L。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15%
操作安全須知:
1) 所有的化學(xué)試劑理應(yīng)被認(rèn)為具有潛在危害,任何的操作都必須提前做好實(shí)驗(yàn)防護(hù)。在操作試劑盒或處理樣本的區(qū)域請(qǐng)不要飲食。
2) 推薦只有經(jīng)過(guò)良好實(shí)驗(yàn)室培訓(xùn)的工作人員方可操作本試劑盒。操作時(shí)請(qǐng)佩戴合適的防護(hù)設(shè)施,例如白大衣、實(shí)驗(yàn)手套、安全眼鏡等。
3) 請(qǐng)不要讓試劑或樣本接觸皮膚、眼睛和粘膜等身體部位。如不慎接觸,請(qǐng)立即用大量清水清洗。
4) 試劑盒中的終止液為酸性溶液,在使用終止液時(shí),請(qǐng)佩戴防-護(hù)服,做好防護(hù)眼睛、手及面部等的措施。
5)檢測(cè)必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范的規(guī)定,嚴(yán)格防止交叉污染,所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室規(guī)定進(jìn)行處置,嚴(yán)禁隨意丟棄。
6)試劑盒的液體組分中,含有防腐劑,可能引起皮膚過(guò)敏反應(yīng),避免吸入煙霧或與皮膚接觸。底物液對(duì)皮膚、眼睛和上呼吸道有刺激作用,避免吸入煙霧。戴上防護(hù)手套,實(shí)驗(yàn)完成后徹-底洗手。